Reacción en Cadena de la Polimerasa en la nefrosis

Tema: Identificación de variantes del gen NPHS2 en niños con síndrome nefrótico corticorresistente

Objetivo: Identificar mutaciones de NPHS2 en niños con SNCR, y establecer la prevalencia de las variantes más frecuentes en un grupo de adultos sanos.

Tipo de muestra biológica: Se extrajo muestra de sangre periférica utilizando un método estándar (QIAamp DNA Mini and Blood Mini, Qiagen) según protocolo del fabricante.

Tipo de Ácido Nucleico a ser extraído: ADN genómico

Kit: Big-Dye Terminator Sequencing Kit

Gen o secuencia a amplificar: NPHS2 variantes p.R229Q y p.A284

Tipo de PCR: PCR utilizando partidores de acompañamiento intrónico y PCR utilizando las enzimas de restricción ClaI y HhaI para p.R229Q y p.A284

Visualización: Se visualizaron mediante electroforesis en gel de agarosa.

Bibliografía
1. Azocar Marta, Vega Álvaro, Farfán Mauricio, Cano Francisco. Identificación de variantes del gen NPHS2 en niños con síndrome nefrótico corticorresistente. Rev. chil. pediatr. [Internet]. 2016 Feb [citado 2021 Jul 9] ; 87( 1 ): 31-36. Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?pid=S0370-41062016000100006&script=sci_arttext